Document Type : Research Paper
Authors
1 phd student, Plant Breeding and Biotechnology Department, Faculty of Agriculture, Tarbiat Modares University, Tehran, I.R. of Iran
2 Head, Department of Plant Breeding and Biotechnology, Faculty of Agriculture, Tarbiat Modares University (TMU), Tehran, I.R. of Iran
3 Plant Breeding and Biotechnology Department, Faculty of Agriculture, Tarbiat Modares University, Tehran, I.R. of Iran
Abstract
To study salt stress tolerance, changes of some solutes such as proline, soluble total proteins and carbohydrate contents in canola seedling’s roots and shoots were studied. Three winter cultivars of canola (Brassica napus L.), including Colvert, Symbol and Agat were treated with 0 (control), 50, 100, and 150 mM NaCl for 6, 12 and 24 h in hydropoic conditions. The data were first tested for normality and then were analyzed according to 3-factorial balanced CRD with three replications. The ANOVA results showed that significant differences between cultivars and salt treatments. Physiological parameters showed significant differences in salinity treatment levels in either roots or shoots. LSD mean comparisons showed the highest accumulation of proline and protein in Colvert roots and shoots at 150 mM NaCl while the highest amount of soluble carbohydrate contents were identified in Colvert roots and shoots in 100 mM NaCl. The results suggest that solutes inhanced in response to salt in salt tolerant canola cultivar.
Highlights
1- امینی، ز.، معلمی، ن. و سعادتی، ص. 1393. مقایسه اثر تنش کم آبی بر تغییرات میزان پرولین و فعالیت آنزیم های آنتی اکسیدان در سه رقم زیتون (Olea europaea L.). مجله پژو هشهای گیاهی (مجله زیست شناسی ایران). جلد 27:. ص 167-156.
2- شریعتی، ش و قاضی شهنی زاده، پ (1379). کلزا، اداره کل آمار و اطلاعات در امور کشاورزی، معاونت برنامه ریزی و بودجه، 81 ص.
3- میرزایی، م.، معینی، 1. و قناتی، ف. 1392. اثر تنش شوری بر میزان پرولین و قندهای محلول گیاهچه های کلزا (Brassica napus). مجله زیست شناسی ایران. جلد 26: ص 98-90.
4-Abdul Jaleel, C., Manivannan, P., Lakshmanan, G. M. A., Sridharan, R. and Panneerselvam, A. 2007. NaCl as a physiological modulator of proline metabolism and antioxidant potential in Phyllanthus amarus. Critical in Research Biologies, 330: 806-813.
5- Apse, M. A. and Blumwald, E. 2002. Engineering salt tolerance in plants. Current Opinion in Biotechnology, 13: 146-150.
6- Ashraf, M. and Foolad, M. R. 2007. Roles of glycine betaine and proline in improving plant abiotic stress resistance. Environmental and Experimental Botany, 59: 206-216.
7- Bates, L. S., Walderen R. D. and Taere, I. D. 1973. Rapid determination of free proline for water stress studies. Plant Soil, 39: 205-207.
8- Bradford, M. 1976. A rapid and sensitive method for quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principle of “protein –dye binding”. Analytical Biochemistry, 72: 248-254.
9- Chakraborty, U. and Tongden, C. 2005. Evaluation of heat acclimation and salicylic acid treatment as potent inducers of thermo tolerance in Cicer artinum L. Current Science, 89: 384-388.
10- Chen, T. H. H. and Murata, N. 2000. Enhancement of tolerance of abiotic stress by metabolic engineering of betaines and other compatible solutes. Current Opinion in Plant Biology, 5: 250-257.
11- Chinnusamy, V., Jagendorf, A. and Zhu, J. K. 2005. Understanding and improving salt tolerance in plants. Crop Science, 45: 437-448.
12- Dubois, M., Gilles, K. A., Hamilton, J. K., Rebes, P. A. and Smith, F. 1956. Colorimetric method for determination of green-type anuual blugrass ecotype. Crop Science, 41: 1862-1870.
13- Garg, A. K., Kim, J. K., Owens, T. G., Ranwala, A. P., Choi, Y. D., Kochian L. V. and. Wu, R. J. 2002. Trehalose accumulation in rice plants confers high tolerance levels to different abiotic stresses. Proceedings National Academy of Sciences online USA, 99: 15898-15903.
14- Hoque, A., Okuma, E., Akhter Banu, N., Nakamura, Y., Shimoishi, Y. and Murata, Y. 2007. Exogenous proline mitigates the detrimental effects of salt stress more than exogenous betaine by increasing antioxidant enzyme activities. Plant Physiology, 164: 553-561.
15- Kattab, H. 2007. Role of glutathione and polyadenylic acid on the oxidative defense systems of two different cultivars of canola seedlings grown under saline condition. Australian Journal of Basic and Applied Sciences, 3: 323-334.
16- Kavi Kishor, P. B., Hong, Z., Miao, G., Hu, C. A. and Verma, D. P. S. 1995. Over expression of D1-pyrroline-5-carboxylate synthetase increases proline overproduction and confers osmtolerance in transgenic plants. Plant Physiology, 108: 1387-1394.
17- Liu, R., Shi, H., Wang, Y., Chen, S., Deng, J., Liu, Y., Li, S. and Chan, Z. 2014. Comparative physiological analysis of lotus (Nelumbo nucifera) cultivars in response to salt stress and cloning of Nn CIPK genes. Scientia Horticulturae, 173: 29-36.
18- Mittler, R. 2002. Oxidative stress, antioxidants and stress tolerance. Trends in Plant Science, 7: 405-410.
19- Mokhamed, A. M., Raldugina, G. N., Kholodova V. P. and Kozneto, V. V. 2006. Osmolyte accumulation in different rape genotypes under sodium chloride salinity. Russian Journal of Plant Physiology, 53: 649-655.
20- Morsya, M., Jouveb, L., Hausmanb, J. F., Hoffmannb L. and Stewarta. J. 2007. Alteration of oxidative and carbohydrate metabolism under abiotic stress in two rice (Oryza sativa L.) genotypes contrasting in chilling tolerance. Plant Physiology, 164: 157-167.
21- Qasim, M., Ashraf, M., Ashraf, M. Y., Rehma, S. U. and Rha, E. S. 2003. Salt-induced changes Two canola cultivars differing in salt tolerance. Biologia Plantarum, 4: 629-632.
22- Rahdari, P., Tavakoli, S. and Hosseini, S. M. 2012. Studying of salinity stress effect on germination, prolin, sugar, protein, lipid and chlorophyll content in purslane (Portulaca oleracea L.) leaves. Journal of Stress Physiology and Biochemistry, 8: 182-193.
23. Rajabi, S., Karimzadeh, G. and Ghanati, F. 2012. Salt-induced changes of antioxidant enzymes activity in winter canola (Brassica napus) cultivars in growth chamber. Journal of Plant Physiology and Breeding, 2(1): 11-21.
24- Riahy, M. and Ehsanpour, A. A. 2012. Effect of salinity on growth, chlorophyll, carbohydrate and protein contents of transgenic Nicotina plumbaginifolia over expressing P5CS gene E3. Journal of Environmental Research and Management, 4: 0164-0170.
25- Sairam, P. K. and Tyagi, A. 2004. Physiology and molecular biology of salinity stress tolerance in plants. Current Science, 86: 407-421.
26- Shah, S. H. 2007. Effects of salt stress on mustard as affected by gibberellic acid application. Plant Physiology, 33: 97-106.
Keywords
Main Subjects
اثرات تنش شوری بر محتوی ترکیبات سازگار در ریشهچه و ساقهچه برخی از ارقام کلزای پاییزه
سهیلا رجبی1، قاسم کریم زاده1* و فائزه قناتی2
1 تهران، دانشگاه تربیت مدرس، دانشکده کشاورزی، گروه اصلاح نباتات و بیوتکنولوژی
2 تهران، دانشگاه تربیت مدرس، دانشکده علوم زیستی، گروه علوم گیاهی
تاریخ دریافت: 5/8/93 تاریخ پذیرش: 13/5/94
چکیده
به منظور مطالعه تحمل به تنش شوری در سه رقم کلزای پاییزه (Brassica napus L.) با نام های Colvert، Symbol و Agat تغییرات مقدار پرولین، پروتیین و قندهای کل محلول در ریشهچه و ساقهچه در چهار تیمار شوری شامل صفر (شاهد)، 50، 100، 150 میلی مولار از NaCl و سه زمان 6، 12 و 24 ساعت در شرایط هیدروپونیک بررسی شد. آزمایش به صورت فاکتوریل سه عاملی در قالب طرح پایه کاملاً تصادفی در سه تکرار انجام گرفت. نتایج حاصل از تجزیه واریانس نشان داد که اختلاف معنیداری بین ارقام و سطوح تیمار شوری وجود دارد. مقایسه میانگینها به روش LSD نشان داد که بیشترین مقدار تجمع پرولین و پروتیین در ریشهچه و ساقهچه رقم Colvert و تیمار شوری 150 میلی مولار از NaCl بود و دو رقم دیگر در ردههای بعدی قرار گرفتند. بیشترین انباشت قندهای کل در ریشهچه و ساقهچه رقم Colvert به شکل مشابه در غلظت 100 میلی مولار از NaCl مشاهده شد. نتایج به دست آمده نشان داد که افزایش اسمولیتهای سازگار مانند پرولین، پروتیین و قندهای کل محلول بر روی تحمل به تنش شوری در ارقام کلزای پاییزه تأثیر گذار بوده است.
واژههای کلیدی: کلزای پاییزه، تنش شوری، پروتیین، پرولین، قندهای محلول
* نویسنده مسئول، تلفن: 02148292103 ، پست الکترونیکی: karimzadeh_g@modares.ac.ir
مقدمه
تنش شوری یکی از مهمترین تنش های غیر زنده می باشد. پیش بینی می شود تا سال 2050 بیشتر از 50% از زمینهای زراعی دنیا شور شوند (19). مراحل جوانه زنی، رشد گیاهچه، رشد رویشی، گلدهی و میوه دهی به شدت تحت تأثیر اثرات زیانبار تنش شوری میباشند که در نهایت موجب کاهش کمی و کیفی محصولات زراعی میگردد (25). دانستن پاسخ ملکولی گیاهان طی تنش های غیر زنده بسیار مهم است تا از طریق آن بتوان تغییرات ژنتیکی را برای تحمل به شرایط تنش ایجاد کرد. گیاهان بر اساس خصوصیات مورفولوژیکی، فیزیولوژیکی و ژنتیکی شان واکنش های مختلفی را به تنش شوری نشان می دهند. در پاسخ به تنش مکانیسم های مختلفی مانند تنظیم هموستازی یون ها (2، 11)، انباشت پروتیین ها در طی فرآیند تنش (26) و بیان آنزیم های آنتی اکسیدانت در از بین بردن رادیکال های اکسیژن (25) در گیاهان وجود دارد که باعث تحمل به تنش در آنها می گردد. یکی از مهمترین راههایی که گیاه برای منفی تر شدن پتانسیل اسمزی سلولهایش انجام میدهد، سنتز مواد آلی اسموپروتکتانت (10) با نام ترکیبات سازگار میباشد (25) که به این فرآیند تعدیل اسمزی گفته میشود. این تعدیل به عنوان یک سازگاری مهم در گیاهان متحمل به شوری میباشد. زیرا این امر به نگهداری فشار تورژسانس و حجم سلول کمک میکند. استفاده از مهندسی ژنتیک و تولید گیاهان ترانسژنیک جهت بالا بردن بیان ژنهای درگیر در سنتز محلولهای سازگار در گیاهان مانند آرابیدوپسیس، برنج، گندم و جنس Brassica منجر به ایجاد تحمل به تنش شوری در مراحل مختلف رشد مانند جوانه زنی، رشد گیاهچه، بقاء و باززایی و عملکردشان شده است (11، 13). تجمع ترکیبات سازگار به سم زدایی گونه های اکسیژن واکنشی کمک نموده و فعالیت های چپرون مانند این ترکیبات موجب حفظ و پایداری ساختار و عملکرد پروتیین ها و ساختارهای سلولی می شوند. قندها، انواع اسیدهای آمینه، پروتیینها و اسیدهای آلی جزء اسمو لیتهای سازگار می باشند. این مواد دارای وزن ملکولی پایین و غیر سمی میباشند (5). دانه های روغنی پس از غلات دومین ذخایر غذایی دنیا را تشکیل می دهند. گیاه کلزا یکی از مهم ترین گیاهان روغنی در سطح جهان است به طوریکه بعد از سویا و پنبه سومین دانه روغنی دنیا مطرح است و در کشور ما نیز به طور مستمر کشت وکار می شود (2). در تحقیق حاضر، به منظور بررسی تحمل به تنش شوری در سه رقم کلزای پاییزه ، تغییرات برخی از اسمولیتهای آلی مانند پرولین، پروتیین و قندهای کل محلول در شرایط تنش شوری مورد بررسی قرار گرفت.
مواد و روشها
تهیه بذور گیاهی، شرایط کاشت و نمونهبرداری: بذور ارقام مورد نظر کلزا از موسسه تحقیقات اصلاح و تهیه نهال و بذر کرج تهیه گردید. بذور با استفاده از هیپوکلریت سدیم 5% (v/v) به مدت min 5 ضد عفونی شدند و سپس 3 بار و هر بار به مدت min 5 با آب مقطر شستشو داده شدند. بعد از جوانه زنی، گیاهچههای شش روزه به محلول هوگلند هوادهی شده منتقل شدند. به منظور استقرار گیاهچه ها در ظروف حاوی هوگلند هوادهی شده به مدت دو روز در اتاق رشد با دمای ºC 22 و فتوپریود 16 ساعت تاریکی و 8 ساعت روشنایی قرار گرفتند و بعد از دو روز با تعویض محلول و تهیه محلول هوگلند حاوی تیمارهای شوری شامل صفر (شاهد)، 50، 100، 150 میلی مولار از NaCl در 3 تکرار به مدت 24 ساعت مورد بررسی قرار گرفت. نمونهبرداری در سه زمان 6، 12 و 24 ساعت انجام و ریشهچه از ساقهچه جدا گردید و نمونهها پس از منجمد شدن با نیتروژن مایع در دمای ºC 80- نگهداری شدند.
سنجش مقدار پرولین: استخراج پرولین از روش اسپکتوفتومتری (9، 7) انجام گرفت. مقدار g 2/0 بافت ریشهچه و ساقهچه به صورت جدا برای هر تکرار وزن شد و در ml 10 سولفوسالیسیلیک اسید 3/3% (v/v) همگن شد. سپس همگنای حاصل در g 2000 در ºC 4 به مدت min 10 سانتریفیوژ شد. بخش روشناور جدا شده و در لوله ml 15 ریخته شد. ml 2 از عصاره در لوله آزمایش ریخته و به هر کدام از لولهها معرف ناین هیدرین و اسید استیک گلاسیال خالص اضافه شد و درب لولهها محکم بسته شدند. لولهها به مدت 1 ساعت در حمام آب جوش قرار گرفته و پس از بیرون آوردن به منظور خنک شدن در درون ظرف آب یخ قرار گرفتند. به هر کدام از لولهها ml 4 تولوئن اضافه شد و پس از بستن در لولهها، به مدت s 15 تا 20 بار ورتکس شدند. پس از تشکیل دو فاز جداگانه، فاز بالایی رنگی تولوئنی که حاوی اسید آمینه پرولین میباشد با دقت جدا گردید و در طول موج nm 520 اسپکتروفتومتر (Cintra6, GBC, Australia) خوانده شد.
سنجش مقدار پروتئین:
استخراج پروتیین با روش برادفورد (8) و استفاده از آلبومین سرم گاوی به عنوان استاندارد انجام گرفت و نمونهها در طول موج nm595 اسپکتوفتومتر خوانده شد.
سنجش قندهای کل محلول: استخراج قندهای کل با استفاده از روش فنل- سولفوریک (12) صورت گرفت. مقدار g 2/0 از نمونههای تازه منجمد شده با ml 2 بافر سدیم فسفات (pH = 7) ساییده شد. همگنای حاصل در g 13000 به مدت min 20 سانتریفیوژ شد. محلول رویی جدا شده و به آن فنل 5% (محلول آبی) و اسیدسولفوریک بسیار غلیظ (98%) اضافه گردید. این واکنش گرمازا و رنگ زا است. پس از تثبیت رنگ (min 15-10) در دمای ºC 30-27 به منظور اندازهگیری قندهای کل محلول و با استفاده از گلوکز به عنوان استاندارد با غلظتهای µg ml-1 30-0 ، جذب محلولها در طول موج nm 490 اسپکتروفتومترخوانده شد.
داده های حاصل از سنجش کمی پرولین، پروتیین و قندهای محلول در قالب آزمایش فاکتوریل سه عاملی با طرح پایه کاملا تصادفی با سه تکرار با استفاده از نرم افزار Minitab 14 و افزار MSTATC بررسی گردید.
نتایج
- پرولین: نتایج حاصل از تجزیه واریانس (جدولهای 1 و 2) نشان داد که اثرات ساده زمان تیمار، تیمار شوری و رقم بر روی پرولین ریشه چه و ساقه چه معنی دار شد و اثر متقابل سه عاملی تیمار در رقم در زمان معنی دار نبود. اثر متقابل دو عاملی تیمار در رقم در سطح احتمال 1% در ریشهچه و ساقه چه معنی دار شد. نتایج نشان داد که حداکثر مقدار تجمع پرولین در ریشهچه و ساقهچه رقم متحمل Colvert (شکلهای 1 و 2) و پس آن رقم Symbol و Agat می باشد.
جدول 1- تجزیه واریانس اثر تیمارها بر روی مقدار پرولین، پروتیین، قندهای کل در ریشهچه در سه رقم کلزای پاییزه
S.O.V. |
DF |
MS |
||
Proline |
Protein |
Carbohydrates |
||
Time (T) |
2 |
0.858*** |
1.563*** |
1.133*** |
Salt (S) |
3 |
21.777*** |
10.944*** |
21.345*** |
Cultivar (cv.) |
1 |
12.926*** |
29.178*** |
7.188*** |
T × S |
6 |
0.046ns |
0.053ns |
0.474*** |
T × cv. |
2 |
0.165ns |
0.001ns |
0.404*** |
S × cv. |
3 |
0.326** |
0.085ns |
1.168*** |
T × S × cv. |
6 |
0.080ns |
0.143* |
0.578*** |
Error |
48 |
0.112 |
0.051 |
0.080 |
CV% |
|
11.2 |
7.5 |
9.4 |
S.O.V (Sources of variasion) منابع تغییرات (Degrees of freedom) DF درجه آزادی
(Mean squares) MS میانگین مربعات Coefficient of Variation (CV%) ضریب تغییرات
ns = Non-significant at 0.05 probability level اختلاف غیر معنی دار در سطح احتمال 5%
*،** ،*** اختلاف معنی دار به ترتیب در سطوح احتمال 5%، 1% و 1/0%
Time (T) زمان Salt (S) شوری Cultivar (cv.) رقم
جدول 2- تجزیه واریانس اثر تیمارها بر روی مقدار پرولین، پروتیین و قندهای کل محلول در ساقهچه در سه رقم کلزای پاییزه
S.O.V. |
DF |
MS |
||
Proline |
Protein |
Carbohydrates |
||
Time (T) |
2 |
1.516** |
0.593*** |
2.596*** |
Salt (S) |
3 |
10.415*** |
20.222*** |
6.418*** |
Cultivar (cv.) |
1 |
11.568*** |
17.226*** |
12.470*** |
T × S |
6 |
0.308ns |
0.157* |
2.358*** |
T × cv. |
2 |
0.211ns |
0.203* |
0.756*** |
S × cv. |
3 |
1.439** |
0.149* |
1.809*** |
T × S × cv. |
6 |
0.443ns |
0.096ns |
1.434*** |
Error |
48 |
0.290 |
0.066 |
0.142 |
CV% |
|
17.9 |
8.5 |
12.50 |
(Sources of variasion) S.O.V منابع تغییرات (Degrees of freedom) DF درجه آزادی
(Mean squares) MS میانگین مربعات *،** ،*** اختلاف معنی دار به ترتیب در سطوح احتمال 5%، 1% و 1/0%
ns = Non-significant at 0.05 probability level اختلاف غیر معنی دار در سطح احتمال 5%
Time (T) زمان Salt (S) شوری Cultivar (cv.) رقم
Coefficient of Variation (CV%) ضریب تغییرات
شکل 1- اثر تیمار شوری بر مقدار پرولین (میلی گرم بر گرم وزن تر) ریشهچه ارقام کلزای پاییزه
شکل 2- اثر تیمار شوری بر مقدار پرولین (میلی گرم بر گرم وزن تر) ساقه چه ارقام کلزای پاییزه
- پروتئین: نتایج حاصل از دو جدول تجزیه واریانس 1 و 2 و بررسی مقدار تغییرات پروتیین محلول در شرایط تنش شوری نشان داد که اثرات ساده زمان تیمار، تیمار شوری و رقم بر روی پروتیین ریشه چه و ساقه چه معنی دار شد و اثر متقابل سه عاملی تیمار در رقم در زمان در ریشهچه در سطح احتمال 5% معنی دار شده است اما در ساقهچه معنی دار نبود. در ساقهچه اثرات دوعاملی زمان تیمار در تیمار شوری، زمان تیمار در رقم و تیمار شوری در رقم معنی دار بود. نتایج حاصل از سنجش مقدار پروتیین در ریشهچه و ساقهچه نشان می دهد که با افزایش سطح تنش شوری مقدار تجمع پروتیین نیز بیشتر شده است که بیشترین مقـدار آن در رقـم متحمل Colvert ، تیمار چـهارم 150 میلی مـولار از NaCl و زمان سوم (h 24) بود و پس از آن رقم نیمه متحمل Symbol و حساس Agat قرار گرفت. (شکلهای 3 و 4).
شکل 3- اثر تیمار شوری و زمان (6، 12 و 24 ساعت (h)) بر مقدار پروتیین (میلی گرم بر گرم وزن تر) ریشهچه ارقام کلزای پائیزه a) Colvert، b) Symbol و c) Agat
شکل 4- اثر تیمار شوری بر مقدار پروتیین (میلی گرم بر گرم وزن تر) ساقهچه رقم های کلزای پاییزه
- قندهای کل محلول: بر طبق جدول تجزیه واریانس 1 و 2 اثرات ساده زمان تیمار، تیمار شوری و رقم بر روی مقدار قند های محلول ریشه چه و ساقه چه معنی دار شد. همچنین اثر متقابل سه عاملی تیمار در رقم در زمان برای مقدار قندهای کل محلول ریشهچه و ساقهچه در سطح احتمال 1/0% بسیار معنی دار بود. بیشترین مقدار تجمع قندهای کل محلول در تیمار 3، زمان 3 و ریشهچه و ساقهچه رقم متحمل Colvert (شکل های 5 و 6) می باشد.
بحث
یکی از مهمترین راه کارهای تحمل به شرایط تنش افزایش مقدار پرولین می باشد (25). داده های حاصل از سنجش مقدار کمی پرولین تحت تنش شوری در سه رقم مورد نظر نشان می دهد که بیشترین مقدار تجمع پرولین در ریشهچه و ساقهچه رقم متحمل Colvert و پس آن رقم Symbol و Agat می باشد. به بیان دیگر، تنش شوری باعث افزایش مقدار پرولین به میزان 1/3 برابر در ریشهچه و 2/4 برابر برای ساقهچه رقم متحمل Colvert بود. طبق بررسی های انجام شده میزان انباشت پرولین تحت شرایط تنش در رقم متحمل بیشتر می باشد. در یک بررسی (21) اثر تنش شوری ( mM NaCl120، 80، 40 و شاهد) بر روی دو رقم حساس و متحمل کلزا بررسی و مشخص شد که میزان تجمع پرولین در رقم متحمل Dunkeld بیشتر از رقم حساس Cyclon بود. به عبارت دیگر، میزان تجمع پرولین در رقم متحمل 2/1 برابر رقم حساس بود. این نتایج با یافتههای تحقیقات برخی دیگر از محققین در رابطه با تغییرات مقدار پرولین در اثر اعمال تنش شوری مطابقت دارد (4، 6، 14، 15، 16 و 17). همچنین گزارشات نشان می دهد تنش خشکی نیز منجر به افزایش تجمع پرولین می گردد (1 و 3).
در تحقیق حاضر مشاهده شد که با افزایش تنش شوری مقدار تجمع پروتیین نیز افزایش یافت که بیشترین میزان تجمع پروتیین در رقم Colvert اتفاق افتاد. مقدار انباشت پروتیین در ریشهچه این رقم 72/1 برابر و برای ساقهچه 5/1 برابر در مقایسه با شاهد می باشد. در ارقام متحمل به تنش، انباشت پروتیین نیز بیشتر است. در یک بررسی (26) بر روی اثر تنش شوری بر خردل (Brassica juncea) مشخص شد که افزایش تنش شوری (50 mM NaCl) منجربه انباشت بیشتر پروتیین شد، به عبارت دیگر تنش شوری منجربه انباشت پروتیین به میزان 21/1 برابر در مقایسه با شاهد شد.
شکل 5- اثر تیمار شوری و زمان(6، 12 و 24 ساعت(h) ) بر مقدار قندهای کل محلول (میلی گرم بر گرم وزن تر) ریشهچه ارقام کلزای پائیزه a) Colvert، b) Symbol و c) Agat
شکل 6- اثر تیمار شوری و زمان (6، 12 و 24 ساعت(h) ) بر مقدار قندهای کل محلول (میلی گرم بر گرم وزن تر) ساقهچه ارقام کلزای پائیزه a) Colvert، b) Symbol و c) Agat
کربوهیدراتها به عنوان اسمولیتهای سازگار نقش بسیار مهمی را در افزایش تحمل گیاهان در شرایط تنش به خصوص تنش شوری بر عهده دارند و بیشترین تجمع قند گلوکز در ریشهچه رقم Colvert می باشد مقدار تجمع قندهای کل در رقم متحمل Colvert در حدود 63/1 برابر نسبت به شاهد افزایش پیدا کرده است. در یک بررسی که بر روی اثر تنش شوری بر روی مقدار کربوهیدراتها بر روی برنج انجام گرفت، مشخص شد که تنش شوری منجربه افزایش تجمع قندهای گلوکز، فروکتوز، ساکاروز و تر هالوز می شود (20). نتایج به دست آمده در این تحقیق با تحقیقات برخی دیگر از محققان در رابطه با تجمع کربوهیدرات ها در شرایط تنش شوری، مطابقت دارد (22 و 24).
از مکانیسمهای تحمل به تنش شوری در گیاهان تجمع اسمولیتهای سازگار می باشد. با توجه به پارامترهای مورد مطالعه در مرحله گیاهچه ای که شامل سنجش برخی از مکانیسمهای تحمل به تنش شوری مانند سنجش ترکیبات سازگار مانند پرولین، پروتیینها، قندهای کل محلول در ریشهچه و ساقهچه بر روی سه رقم کلزا مشاهده میشود، رقم Colvert متحمل تر از دو رقم دیگر بوده است. رقم Symbol نیمه متحمل و رقم Agat به عنوان رقم حساس شناخته شدند انباشت این مواد منجربه تعدیل اسمزی و کمک به نگهداری فشار تورژسانس و حجم سلول و در نهایت تحمل به شرایط تنش شوری می نماید. شرایط تنش موجب تولید گونه های اکسیژن واکنشی (Reactive Oxygen Species or ROS) شامل رادیکال سوپراکسید( (O، پراکسید هیدروژن (H2O2) و رادیکال هیدروکسیل (OH∙) می باشد (18). گیاهان دارای انواع مکانیسم های آنزیمی و غیر آنزیمی برای از بین بردن ROS ها هستند (11). اثر تنش شوری بر روی فعالیت آنزیم های آنتی اکسیدانت در سه رقم مورد نظر کلزای پاییزه توسط محققین (23) بررسی شده است که بیشترین فعالیت این آنزیم ها در رقم متحمل Colvert گزارش شده است.